在接受杂志采访的芹泽豪，收到青砥的求助电话后来到她的公寓，他们遇到了生物杂志的撰稿人古沟俊树，他想要领养已经去世的桑岛雄司留下的蜘蛛，其妻桑岛美香却拒绝他的要求，因此求助于芹泽等人。
桑岛雄司被饲养的巴西游走蛛咬伤中毒而死，警方认为这只不过是一场意外，但是芹泽他们在调查中发现了很多疑点，榎木径等人又被卷入此次的密室案件。
在调查中，事件的真相被榎木逐渐揭开。案发当日，美香用二氧化碳杀死了桑岛雄司最喜欢的巴西巨人金直间蜘蛛卡梅隆，取出它的身体，把皮盖在了巴西游走蛛的身上，再将其放回饲养卡梅隆的水槽中。雄司像往常一样回来后取出卡梅隆，被咬了之后也不以为意，实际上游走蛛的剧毒在体内蔓延，因此毒发身亡。
翌日早晨，美香在管理员打扫之际来到公寓，装作发现了尸体，支走管理员外出报案，将现场伪装成雄司喂饲料时发生意外，原本想要回收自己罪证的蜘蛛，却遍寻不到。所以她不愿将蜘蛛交给古沟，想要把蜘蛛全部饿死以销毁证据。榎木径通过发现本应该死亡的蟋蟀却没有死，找到了披着卡梅隆毛皮的巴西游走蛛的尸体。
一切被揭露的美香终于说出了自己的杀人动机，桑岛知道了美香只是为了其财富才嫁给他，便想要离婚，美香就在离婚前将丈夫杀害想要继承其遗产。榎木径成功的推理出美香密室杀人的手法使其伏法。
上锁的房间第5集剧情介绍明新工务店的竹本社长死于承包施工的一套房屋内，关系到自己负责的收购合同，芹泽就此次的事件展开调查。警视厅搜查一课的鸿野光男先芹泽一步找到榎木径帮忙调查此次的密室案件。
案发现场的房屋因为之前发生地震，发生扭曲，损坏严重，竹本社长来调查房屋的受损情况，屋主杉崎在附近的望丘高中教数学，案发时的周六他在学校为棒球部作指导，等他回去后，发现竹本已死。
榎木径在调查中一点点揭开了案件的真相：杉崎的女友在结婚前以房屋损坏为借口，提出取消婚礼，与他分手，所以杉崎要求竹本退款，二人在电话中发生争论，竹本说到女友离开杉崎是其自身原因，杉崎愤怒中动了杀人的念头。
他趁棒球部外出跑步的一小时离开学校，将竹本杀死后离开，利用棒球部的自动发球机，借助通风孔使用网球从房屋外面把门关上，散落在房间的网球因为地势倾斜和墙壁上的塑料布聚集到一起，再利用吸尘器从外面将球吸出来，并扯下塑料布，因此房间内留下了胶带的贴痕， 网球上面的毛遗落在房间内，留下了犯罪证据，没有不在场证明的杉崎最终在榎木径的推理下伏法。
上锁的房间第6集剧情介绍密室剧场
青砥约榎木径去看同一事物所的水城里奈参演的舞台剧“囚禁在密室里的男人”，演出结束后，来到休息室看望里奈的二人却发现参加暖场演出的演员药师寺冈史被人用木刀打中头部死于自己的休息室，共同参加暖场演出的导演畑山奈绪，编剧鬼冢隼人和里奈的男友井冈佑树三人成为犯罪嫌疑人，为了帮里奈的男友洗脱嫌疑，榎木径等人再一次调查此次的密室案件。究竟凶手是谁?他又是怎样在这么多观众的眼前，营造出的密室剧场杀人案件呢?
在调查中，案件的真相渐渐被揭开：药师寺发现了井冈为鬼冢代写剧本，并以此要挟鬼冢，鬼冢在暖场表演结束后来到药师寺的左侧休息室，用木刀将他打死，然后躲在布景后，以人眼难以洞察的缓慢速度横穿舞台。鬼冢推脱自己是意外杀人，但是榎木发现舞台上留有鬼冢用布景练习的痕迹，最终鬼冢在不可辨驳的事实面前伏法。
上锁的房间第7集剧情介绍狐火の家
芹泽准备周末去摩纳哥观看大奖赛，在律师事务所，来自长野的远藤先生求助于他们帮忙调查一桩密室杀人案件，死者是女中学生西野爱实，其父作为犯罪嫌疑人被带到警局，而远藤认为应该是爱实被其哥哥猛所杀，究竟谁才是真正的凶手?案件的真相又是什么?芹泽以去摩纳哥为理由只委托榎木径和青砥去长野调查此次的案件。
在调查中他们发现了很多疑点，而真相也在逐渐揭开：案发前夜猛回到长野老家，家里没人他从二楼螺丝锁松掉的窗户潜入房间，遇到了第二天结束课外活动回到家中的爱实，言语不和后猛失手杀死妹妹，不久父亲西野回到家后，发现了爱实的尸体，而猛要求父亲将家中的金条给自己，想要外出避风头，西野气愤之下将猛杀死，抛尸于厕所下面，并伪装成密室杀人案件。为了将警方视线转移至猛的身上，西野潜入到猛在东京的房子，将金条栽赃给猛，却留下了犯罪证据。最后西野在痛苦中承认了自己的犯罪事实。
上锁的房间第8集剧情介绍待续.......
